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雷火亚洲电竞平台官网-睾丸酮丛毛单胞菌的分离方法及相关研究!

2023-11-06


情况正蒙受到类固醇化合物的严重污染,人类健康面对侧重年夜要挟,睾丸酮丛毛单胞菌(Comamonas testosteroni)对类固醇化合物的降解感化为我们对类固醇化合物污染的治理。睾丸酮丛毛单胞菌(comamonastrstosteroni)是丛毛单胞菌属的一个种,在天然界平分布普遍,为前提致病菌,可引发呼吸道等部位的传染。国内还没有见从血液平分离出该菌的报导。我们从血雷火电竞官网入口液培育中持续两次分手出统一种睾丸酮丛毛单胞菌。1、菌种简介睾丸酮丛毛单胞菌 ( C.testosteroni)是丛毛单胞菌属( Comamonas)的一个种 ,在天然界平分布普遍 ,为前提致病菌,可引发呼吸道等部位的传染。国外已有从血液、脓液、尿液和呼吸道排泄物等临床标天职离出该菌的报导 。我们从血液培育中持续两次分手出统一种睾丸酮丛毛单胞菌。睾丸酮丛毛单胞菌 ( C.testosteroni)是丛毛单胞菌属( Comamonas)的一个种 ,在天然界平分布普遍 ,为前提致病菌 ,可引发呼吸道等部位的传染。国外已有从血液、脓液、尿液和呼吸道排泄物等临床标天职离出该菌的报导 ,但作者还没有见国内有关报导。2、睾丸酮丛毛单胞菌的特点特征营养体:粗长杆状,两头钝圆,革兰氏染色反映不定,发生聚β-*盐(PHB)颗粒。菌体巨细为(1.0~1.2)×?(2.5~7.0)μm?,菌体四周有厚荚膜。芽孢:壁厚,卵形,中生或近端生,芽孢囊不膨年夜或微膨年夜。菌落圆形,无色,隆起,胶质黏稠,透明或半透明,边沿整洁。好氧或兼性厌氧发展,水解淀粉,接触酶反映阳性,氧化酶和卵磷脂酶反映阴性,在无氮培育基上发展杰出,发展温度10?℃?~?45?℃。3、睾丸酮丛毛单胞菌的特点1、该菌具有解磷、解钾的功能。2、具有活化泥土中硅、钙、镁中量元素感化。3、具有提高铁锰铜锌钼硼供给的功能。4、提高或耽误肥效,削减化肥用量。5、提高着物抗逆性,预防或减轻病害。4、血液平分离出睾丸酮丛毛单胞菌而睾丸酮丛毛单胞菌胞菌在降解类固醇、多环芳烃类物资 PHAs 等不变原始菌株只具有 Amp 抗性,只能发展在含 Amp 的污染化合物中具有主要感化 Coulter and Talalay 培育基中发展,不克不及在含有这两种抗生素的培育基1968 Goyal and Zylstra 1996mobuset al. 1997 中发展。Mobus and Maser 1998 Maser et al. 2000 2001 bp M 1 2Skowasch et al. 2002,在污染情况修复中饰演侧重要的脚色。睾丸酮丛毛单胞菌的 3琢HSD/CR 是一种 15000 10000引诱酶,在该细菌染色体上 3琢HSD/CR 基因的上游 7500 5000存在两个 10 bp 的回文把持基因序列,该基因四周还存在两个按捺子 RepA 和 RepB, 经由过程转录和翻译抑 2500 2000制该基因的表达 Xiong and Maser 2001 Xiong et al.2001 2003a b c。 1000 活化因子activator是指与加强子或与活化因子 750连系区域连系的卵白,可以或许提高转录的肇端速度 500Browning and Busby 2004。戴艺平易近等2005 2006将 250来自睾丸酮丛毛单胞菌的全长 564 bp 和部门409 100bp activator 别离与来自睾丸酮丛毛单胞菌的3琢HSD/CR 在体外进行共转化研究,5、成果注解睾丸1 PCR 挑选工程菌酮丛毛单胞菌的 activator 能提高 3琢HSD/CR 转录 Figure 1 Genetically engineered bacteria screened by PCR速度。 C. Wide range DNA marker 10015 000 1: test pa M:因为人工合成和生物本身代谢排入情况中的类 C. 2:testpb固醇污染物一日千里,有雷火app需要对睾丸酮丛毛单胞菌.基因工程菌的 Southern 检测进行革新,提高该细菌的 3琢HSD/CR 等一系列降解酶基因的表达,才能到达操纵睾丸酮丛毛单胞菌快提取睾丸酮丛毛单胞菌野生菌在图简写为速降解该类污染物、净化情况的目标。 本研究操纵电 C. C. test,下 同 、testpa和 C. testpb 的染色体穿孔法将重组质粒 pKtac1act1 和 pKtac1act2 整合 DNA, EcoR玉酶切落后行杂交检测, ddH2O 感化 以化入睾丸酮丛毛单胞菌的染色体中,挑选获得 2 株 为阴性对比,以 EcoR玉酶切 pKtac1 作为阳性对比。睾丸酮丛毛单胞菌基因工程菌,对这两株基因工程 Southern 杂交的成果。从 Southern 杂交图可菌的要害酶 3琢HSD/CR 表达环境和细菌不变性进见 ,基 因 工 程 菌 C .testpa 和 C.testpb 的染色体行检测阐发,以期为进一步操纵工程菌供给理论基 DNA 有较着的杂交条带,睾丸酮丛毛单胞菌的染色础。体 DNA 没有杂交条带的呈现。因为睾丸酮丛毛单胞菌的染色体上不存在 pK18 的片断,而在遴选出来的1 成果与阐发 基雷火app官网下载因工程菌的染色体上可以或许检测到 pK18 的片断的1.1 操纵 PCR 挑选基因工程菌存在,因而可知质粒 pKtac1act1 和 pKtac1act2 确切整合入睾丸酮丛毛单胞菌的染色体中。质粒电穿孔转化后的细菌在含有 Amp 和 Kan的 LB 固体培育基上 30℃ 留宿培育。遴选单克隆在 1.3 睾丸酮对细菌的引诱含有 Amp 和 Kan 的 LB 液体培育基中进行留宿振睾丸酮丛毛单胞菌的 3琢hsd/CR 是受睾丸酮诱荡培育,提取重组子的染色体 DNA 作为模板, A1 以导的酶。在 LB 培育基中添加睾丸酮对 Comamonas和 A2 为引物进行 PCR 扩增,扩增产品用 1.0的琼 C. testosteroni、 testpa 和 C. testpb 进 行留宿培育 ,脂糖凝胶进行电泳 图 1。挑选到 2 株基因工程菌,睾丸酮的终浓度为 270 滋g/mL。别离提取这 3 个菌即质粒 pKtac1act1 同源整合入睾丸酮丛毛单胞菌株的总卵白,将细菌的总卵白定量为 1 mg/mL, 稀释染色体发生的工程菌 C. testpa 和质粒 pKtac1act2 100 倍后,用 ELISA 法检测 3琢HSD/CR 的表达量,同源整合入睾丸酮丛毛单胞菌染色体发生的工程菌成果。从中可见,睾丸酮丛毛单胞菌野睾丸酮丛毛单胞菌工程菌构建和不变性阐发。北京百欧博伟生物手艺有限公司的微生物菌种查询网供给微生物菌种收藏、测序、采办等办事,是中国微生物菌种收藏中间的办事平台,而且是集微生物菌种、菌种,ATCC菌种、细胞、培育基为一体的年夜型微生物查询类网站,自设装备和手艺的微生物菌种收藏中间!接待泛博客户来询!下载附件-雷火电竞网站



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